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高加索三叶草（Trifolium ambiguum Bieb．）是许多干旱和寒冷地区可以种植并在各方面表现优良的三叶草种，建立适用于高加索三叶草的ISSR反应体系，将为ISSR标记技术在三叶草属品种资源研究中的应用提供参考。本试验通过优化影响高加索三叶草ISSR—PCR的主要参数，建立适于高加索三叶草的ISSR反应体系和扩增程序。在25μL体系中各反应物的最适含量为：20ng模板DNA，0．2mmol／LdNTP，0．8μmol／LISSR引物，1．0UTaqDNA聚合酶，2．5μL10×PCR