【摘 要】
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根据李矮缩病毒(prune dwarf virus,PDV)外壳蛋白基因序列的保守区设计特异性引物和探针,建立了PDV的重组酶聚合酶扩增一侧流层析试纸条(recombinase polymerase amplificati
【机 构】
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北京市林业果树科学研究院,农业农村部华北地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室,北京市落叶果树工程技术研究中心,北京100093
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根据李矮缩病毒(prune dwarf virus,PDV)外壳蛋白基因序列的保守区设计特异性引物和探针,建立了PDV的重组酶聚合酶扩增一侧流层析试纸条(recombinase polymerase amplification combined with lateral flow dipstick,RPA-LFD)检测方法.该方法在恒温39 ℃下反应20min,具有标记的扩增子可达到检测水平.扩增子检测室(amplicon detection champer)中的侧流层析试纸条在20 min内呈现可视化检测结果.该方法与侵染樱桃的另外6种病毒(CGRMV、PNRSV、LchV-1、PBNSPaV、CVA和CNRMV)无交叉反应.灵敏度试验表明,用RPA-LFD方法检测PDV的灵敏性是PCR方法的10倍.用该方法检测13个田间样品,其检测结果与PCR检测结果一致.RPA-LFD法具有操作简单、快速、灵敏度高、特异性强等特点,适合对PDV样品的快速检测与鉴定.
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