山羊痘病毒P32基因的克隆、测序及在原核细胞表达

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为比较山羊痘病毒贵州分离株丹2基因与国内外分离株的关系,并获得P32蛋白,应用PCR方法从贯州山羊痘病毒分离株的核酸样本中扩增出丹2基因片段,将PCR产物克隆至pMD18-T载体,对重组质粒进行了基因序列测定。将测定的P32基因核苷酸序列和推导的氨基酸序列与GenBank中相应序列作比较,同源性分别达到99.4%和98.4%,表明山羊痘病毒的P32基因具有高度保守性。将丹2基因克隆至原核表达载体pET-28a,成功构建重组表达质粒pET-28a-P32/LD,转化至大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。
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