【摘 要】
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目的:探索积雪草酸(asiatic acid,AA)对紫杉醇(paclitaxel,PTX)耐药性胶质瘤细胞的抑制作用及其可能的作用机制。方法:CCK-8实验、实时荧光定量PCR、Western blotting检测AA
【机 构】
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济南市市中区人民医院儿科; 济南市市中区人民医院肿瘤科;
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目的:探索积雪草酸(asiatic acid,AA)对紫杉醇(paclitaxel,PTX)耐药性胶质瘤细胞的抑制作用及其可能的作用机制。方法:CCK-8实验、实时荧光定量PCR、Western blotting检测AA对成胶质细胞瘤U87MG细胞的增殖、凋亡的影响。浓度递增法构建PTX耐药性细胞株PR-U87MG,以U87MG细胞为对照,CCK-8实验验证PR-U87MG细胞对PTX的耐药性,实时荧光定量PCR、Western blotting检测PR-U87MG细胞中MDR1、LRP mRNA及蛋白的表达水平。AA和PTX单独或联合处理PR-U87MG细胞,CCK-8实验、实时荧光定量PCR、Western blotting检测各组细胞增殖活力及凋亡的变化。结果:成功构建PTX耐药性细胞株PR-U87MG。AA可以剂量依赖方式抑制U87MG细胞和PR-U87MG细胞的增殖活力(P<0.01),并明显促进其凋亡(P<0.01)。与AA或PTX单独处理组相比,联合处理组中PARP1的蛋白水平显著减少(P<0.01),caspase 3的裂解量显著增加(P<0.01),耐药相关蛋白P-糖蛋白1(P-dycoprotein 1,Pgp-1)和LRP表达水平显著减少(P<0.01)。结论:AA可有效增强U87MG胶质瘤细胞株对PTX的敏感性,其机制可能与AA抑制具有药物排出功能的耐药蛋白Pgp-1和LRP表达有关。
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