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针对大肠杆菌（Escherichia coli）0157：H7的致病基因eae设计了特异性引物，并用荧光染料SYBR Green Ⅰ进行了实时定量聚合酶链式反应（Real—time PCR）。熔解曲线显示产物特异性较强，无非目的条带和二聚体产生。并对反应程序进行了优化，确定了最佳的反应程序，最终在合适的模板浓度内得出了标准曲线。结果显示Real-time PCR比普通PCR灵敏1000倍。