【摘 要】
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目的 基于基因间隔序列（ITS）序列对灵芝进行分类。方法 培养灵芝、提取DNA、优化聚合酶链反应（PCR）体系、纯化与克隆、测序、构建遗传进化树、进行遗传分析。结果 经过一系列的梯
【机 构】
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湖南工业大学包装与材料工程学院,湖南中医药高等专科学校
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目的 基于基因间隔序列（ITS）序列对灵芝进行分类。方法 培养灵芝、提取DNA、优化聚合酶链反应（PCR）体系、纯化与克隆、测序、构建遗传进化树、进行遗传分析。结果 经过一系列的梯度实验得知优化的PCR体系为25μl反应混合物中含模板DNA 25 ng、Mg2＋为2.0 mmol/L、d NTPs 200μmol/L、Taq 1.5 U、引物为20 pmol;最佳反应程序为93℃预变性4 min,93℃变性40 s,59℃退火40 s,72℃延伸1 min,共35个循环,72℃继续延伸7 min,4℃无限
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