人分泌型内皮抑素基因的克隆及表达

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目的获得人分泌型内皮抑素(endostatin)基因并在大肠杆菌中进行表达,为其应用于肿瘤的治疗奠定基础。方法合成含信号肽的上游引物,用聚合酶链反应技术克隆人分泌型内皮抑素基因,10 g.L-1琼脂糖凝胶电泳后回收将其重组入T载体,双脱氧末端终止法测定其核苷酸序列。定向克隆重组人pBV220表达载体,转化大肠杆菌DH5α,42℃热诱导表达。结果经Gen-bank分析证实,所获得的645 bp基因片段序列正确。经SDS-PAGE分析,出现特异性蛋白质条带,与人内皮抑素蛋白大小相符合,表达量为14.5%。结论
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