基于3D氧化石墨烯支架研究PM2.5对神经干细胞增殖的毒性作用

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目的 利用氧化石墨烯(graphene oxide,GO)支架对神经干细胞(neural stem cells,NSCs)进行体外三维(three dimension,3D)培养,研究大气细颗粒物(fine particulate matter,PM2.5)对NSCs增殖的毒性作用.方法 采用salt-leaching方法制备GO支架;利用荧光显微镜和扫描电子显微镜(scanning electronic microscope,SEM)分析NSCs培养在GO支架中的生长状态;分别在Nunc四孔板(聚苯乙烯)和GO支架3D培养条件下,利用CCK-8法分析不同浓度PM2.5(10~300 μg/mL)对NSCs分别染毒24、48、72小时后对增殖的影响.结果 荧光显微镜分析结果显示,GO支架内的神经球Nestin抗体荧光染色呈阳性;SEM分析结果显示,NSCs在支架内以神经球形聚集性生长,且单个细胞之间通过突起相连接;CCK-8检测细胞增殖活性结果显示:随PM2.5浓度的增大NSCs增殖率降低;PM2.5浓度相同时,随着时间的延长GO支架培养组NSCs增殖率逐渐升高.结论 成功将GO支架应用于NSCs的体外3D培养;在体外3D生长条件下,阐明PM2.5对NSCs的增殖具有毒性作用.
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