基于响应面法优化以ABTS为底物的漆酶测定方法及其应用

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为探索一种最佳的漆酶酶活力测定反应体系条件,从而确定更为准确的酶活力测定方法,以漆酶标品为研究对象,以2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)为底物,采用分光光度法确定漆酶标品稀释倍数与ΔOD值之间的线性关系以及最佳酶促反应时间,选取酶活力测定反应体系中的缓冲液浓度、pH值以及ABTS浓度作为影响因素进行单因素优化,以所测定漆酶酶活力为响应值进行响应面优化与评估。结果表明,漆酶标品稀释倍数在30~80之间与吸光度变化值线性关系良好,酶促反应中最佳酶活力测定时间为起始3 min。反
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