【目的】探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对脑毛细血管内皮细胞P-糖蛋白(P-gp)和利培酮吸收的影响机制。【方法】以小鼠脑毛细血管内皮细胞株bEnd.3作为研究对象,细胞孵育重组TNF-α,然后进行western blot检测c-jun氨基端激酶(JNK)磷酸化水平。另外,bEnd.3细胞以SP600125预处理1 h,并设DMSO对照组,两组孵育TNF-α,以western blot检测P-gp表达水平。bEnd.3细胞孵育TNF-α24 h,并设对照组,然后加入利培酮(2μg/L)再孵育24 h,最后吸取细胞培养基上清,以高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS)测定利培酮浓度。【结果】TNF-α能激活bEnd.3细胞JNK磷酸化。TNF-α能上调P-gp的表达,但SP600125降低TNF-α这一效应,差异具有统计学意义。TNF-α能增加利培酮在bEnd.3细胞培养基上清的浓度(μg/L,1.17±0.18 vs 0.86±0.17,P=0.010)。【结论】JNK信号通路参与TNF-α上调P-gp的表达过程,TNF-α能抑制脑毛细血管内皮细胞吸收利培酮。