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摘 要：目的：通过分析整理近年来国内外关于荷叶的研究成果，对荷叶中生物碱类、黄酮类成分的提取纯化工艺做以研究。方法：从化学成分、提取分离、质量评价方法和药理活性等多个方面对荷叶的研究现状进行了论述。结果：荷叶中有效成分的提取纯化研究、质量控制方法的研究和基于主要药理活性的相关作用靶点确定等方面的研究都有待于加强，以期对荷叶植物资源进行深入研究和合理开发利用。
关键词：荷叶；生物碱；提取；纯化
荷叶为睡莲科多年生水生植物莲（Nelumbo nucifera）的新鲜或干燥葉片，夏、秋二季采收，是一种常见的药食两用药材。荷叶广泛分布于长江、黄河和珠江三大流域，在我国有着悠久的种植和应用历史。我国历史上有很多文人雅士写下了关于莲的诗词，可见中国人对莲的喜爱。在《神农本草经》当中也有关于荷叶、莲子、藕节、莲子心、莲须的记载，其中荷叶的主要活性成分为黄酮类和生物碱类物质。随着现代社会的发展，对中药材荷叶的研究也在逐渐深入，荷叶中黄酮类成分多为槲皮素、异槲皮素、山柰酚以及其他苷元的单糖或多糖苷类化合物[1]。荷叶的药理作用广泛且毒副作用小，具有较大的研究潜力。现代研究表明荷叶具有降脂减肥、抗氧化、抗癌和治疗心血管疾病等多种生物活性，具有较好的药用价值[2]。本文作者通过分析整理近年来国内外关于荷叶中生物碱的提取及纯化工艺的研究成果，对荷叶中生物碱类、黄酮类成分的相关研究做以下总结。
1 化学成分研究
荷叶中的生物碱研究始于公元十九世纪，日本科学家自福田真雄[3]等从荷叶中分离出荷叶碱，O-去甲基荷叶碱以及莲碱 3个成分以来，荷叶生物碱的提取分离受到越来越多人的关注。国内外学者先后从荷叶中分离得到二十多种生物碱类成分[4]，主要分为以下几种：单苄基异喹啉类生物碱 6 种；阿朴啡类生物碱 6 种；氧 化 阿 朴 啡 类 2 种；去氢阿朴啡类生物碱 4 种；原阿朴啡类生物碱以及双苄基异喹啉类生物碱3种。
2 提取与分离研究
荷叶中生物碱的碱性较弱，不能直接溶于水。目前，从荷叶中提取生物碱的方法主要有酸提碱沉结合有机溶剂萃取法、连续加热回流提取法、微波提取法、超声提取法等。现在的荷叶提取方法被广泛应用于生物碱的提取与分离技术中，并进一步结合正交设计的方法优化荷叶中生物碱类成分的提取效率。李耀中等[5]采用罐组逆流提取技术提取荷叶中的生物碱，并使用正交设计实验得出荷叶生物碱的最佳提取条件为：80摄氏度，提取25分钟，固液比例1：50，提取溶剂为75%的乙醇。该方法优点在于可以保持固液两相较高的浓度差，进而提高提取效率，缩短提取时间。
3 质量评价研究
荷叶中黄酮和生物碱类成分的定量研究以比色法和高效液相色谱法为主要手段，液质联用法定性定量分析也在逐步推广使用中。马亚琼等[6]研究方法同时鉴别了蓮属不同组织中的花青素类成分和非花青素类的黄酮成分。结果发现，叶肉、叶脉和叶茎中的黄酮种类一致，但叶肉中的黄酮含量要远高于叶脉和叶茎中黄酮含量。叶肉中 3 种主要的槲皮素类糖苷占所有被检测到的黄酮含量70% 以上。
4 药理作用
荷叶具有抗氧化、降脂减肥、抗癌、保护肝脏和心血管等一系列药理活性已经得到专家学者的证实。其中主要的药理学用有？抗氧化活性：荷叶中总生物碱对氧自由基是有清除作用的，荷叶水提液、荷叶醇提液及维生素 C 的抗氧化活性均明显有效。？抗 HIV 活性 ：去甲乌药碱和槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷具有抗 HIV 活性。在进行构效关系的试验中发现3个双苄基异喹啉类生物碱和1个阿朴菲类生物碱荷叶碱同样具有抗HIV的活性，这些化合物可作为未来治疗 AIDS的潜在前体药物进行进一步的研发。？心血管保护活性：荷叶中的双苄基异喹啉类生物碱如莲心碱，异莲心碱和甲基莲心碱，具有十分显著的抗心律失常作用。4 种药物及冠动脉结扎的方法构建动物心律失常模型，比较了异莲心碱和阳性药物奎尼丁的抗心律失常效果，研究表明异莲心碱具有显著的抗各种实验性心律失常作用，且活性优于奎尼丁，其抗心律失常机制可能与阻滞Ca2 +，Na+电流有关。
5 讨论
随着现代研究技术的发展，关于这两类成分的研究也在不断的深入。降脂减肥是目前荷叶的一类主要临床应用，大量研究数据也证明荷叶中黄酮和生物碱类物质均具有良好的降脂减肥活性，但这两类物质在荷叶降脂减肥功效中发挥的作用以及两类物质间是否存在协同效应仍需要进一步研究。此外，荷叶中有效成分的提取纯化研究，相关作用靶点的寻找，以及荷叶长期服用的毒副反应研究都有待进一步加强。从化学成分、提取分离、质量评价方法和药理活性等多个方面对荷叶的研究现状进行了综述，希望能为荷叶相关的研究和生产提供科学方面的参考。结合目前研究状况来看，荷叶中有效成分的提取纯化研究、质量控制方法的研究和基于主要药理活性的相关作用靶点确定等方面的研究都有待于加强，以期对荷叶植物资源进行深入研究和合理开发利用。
参考文献：
[1]佟文娟， 张社兵，等. 荷叶生物碱下调THP-1源性巨噬细胞microRNA-33a-5p的表达及上调ABCA1/G1的表达[J]. 中国动脉硬化杂志， 2016， 24（12）：1219-1223.
[2]沈白， 张社兵，等. 荷叶生物碱对THP-1源性巨噬细胞CD36及PPARγ表达的影响[J]. 中国动脉硬化杂志， 2015， 23（8）：784-788.
[3]余里富， 余健. 一种荷叶生物碱提取方法及其应用：， CN105395614A[P]. 2016.
[4]陈曦， 戚进. 荷叶中黄酮和生物碱的研究进展[J]. 中国实验方剂学杂志， 2015（18）：211-214.
[5]李耀中， 孟祥斌. 荷叶中总黄酮总生物碱及叶重变化规律的研究[J]. 中国现代药物应用， 2015， 9（22）：278-279.
[6]马亚琼， 赵永强等.莲属不同组织中的花青素类成分和非花青素类的黄酮成分：， CN105254563A[P]. 2016.
关键词：荷叶；生物碱；提取；纯化
荷叶为睡莲科多年生水生植物莲（Nelumbo nucifera）的新鲜或干燥葉片，夏、秋二季采收，是一种常见的药食两用药材。荷叶广泛分布于长江、黄河和珠江三大流域，在我国有着悠久的种植和应用历史。我国历史上有很多文人雅士写下了关于莲的诗词，可见中国人对莲的喜爱。在《神农本草经》当中也有关于荷叶、莲子、藕节、莲子心、莲须的记载，其中荷叶的主要活性成分为黄酮类和生物碱类物质。随着现代社会的发展，对中药材荷叶的研究也在逐渐深入，荷叶中黄酮类成分多为槲皮素、异槲皮素、山柰酚以及其他苷元的单糖或多糖苷类化合物[1]。荷叶的药理作用广泛且毒副作用小，具有较大的研究潜力。现代研究表明荷叶具有降脂减肥、抗氧化、抗癌和治疗心血管疾病等多种生物活性，具有较好的药用价值[2]。本文作者通过分析整理近年来国内外关于荷叶中生物碱的提取及纯化工艺的研究成果，对荷叶中生物碱类、黄酮类成分的相关研究做以下总结。
1 化学成分研究
荷叶中的生物碱研究始于公元十九世纪，日本科学家自福田真雄[3]等从荷叶中分离出荷叶碱，O-去甲基荷叶碱以及莲碱 3个成分以来，荷叶生物碱的提取分离受到越来越多人的关注。国内外学者先后从荷叶中分离得到二十多种生物碱类成分[4]，主要分为以下几种：单苄基异喹啉类生物碱 6 种；阿朴啡类生物碱 6 种；氧 化 阿 朴 啡 类 2 种；去氢阿朴啡类生物碱 4 种；原阿朴啡类生物碱以及双苄基异喹啉类生物碱3种。
2 提取与分离研究
荷叶中生物碱的碱性较弱，不能直接溶于水。目前，从荷叶中提取生物碱的方法主要有酸提碱沉结合有机溶剂萃取法、连续加热回流提取法、微波提取法、超声提取法等。现在的荷叶提取方法被广泛应用于生物碱的提取与分离技术中，并进一步结合正交设计的方法优化荷叶中生物碱类成分的提取效率。李耀中等[5]采用罐组逆流提取技术提取荷叶中的生物碱，并使用正交设计实验得出荷叶生物碱的最佳提取条件为：80摄氏度，提取25分钟，固液比例1：50，提取溶剂为75%的乙醇。该方法优点在于可以保持固液两相较高的浓度差，进而提高提取效率，缩短提取时间。
3 质量评价研究
荷叶中黄酮和生物碱类成分的定量研究以比色法和高效液相色谱法为主要手段，液质联用法定性定量分析也在逐步推广使用中。马亚琼等[6]研究方法同时鉴别了蓮属不同组织中的花青素类成分和非花青素类的黄酮成分。结果发现，叶肉、叶脉和叶茎中的黄酮种类一致，但叶肉中的黄酮含量要远高于叶脉和叶茎中黄酮含量。叶肉中 3 种主要的槲皮素类糖苷占所有被检测到的黄酮含量70% 以上。
4 药理作用
荷叶具有抗氧化、降脂减肥、抗癌、保护肝脏和心血管等一系列药理活性已经得到专家学者的证实。其中主要的药理学用有？抗氧化活性：荷叶中总生物碱对氧自由基是有清除作用的，荷叶水提液、荷叶醇提液及维生素 C 的抗氧化活性均明显有效。？抗 HIV 活性 ：去甲乌药碱和槲皮素-3-O-葡萄糖醛酸苷具有抗 HIV 活性。在进行构效关系的试验中发现3个双苄基异喹啉类生物碱和1个阿朴菲类生物碱荷叶碱同样具有抗HIV的活性，这些化合物可作为未来治疗 AIDS的潜在前体药物进行进一步的研发。？心血管保护活性：荷叶中的双苄基异喹啉类生物碱如莲心碱，异莲心碱和甲基莲心碱，具有十分显著的抗心律失常作用。4 种药物及冠动脉结扎的方法构建动物心律失常模型，比较了异莲心碱和阳性药物奎尼丁的抗心律失常效果，研究表明异莲心碱具有显著的抗各种实验性心律失常作用，且活性优于奎尼丁，其抗心律失常机制可能与阻滞Ca2 +，Na+电流有关。
5 讨论
随着现代研究技术的发展，关于这两类成分的研究也在不断的深入。降脂减肥是目前荷叶的一类主要临床应用，大量研究数据也证明荷叶中黄酮和生物碱类物质均具有良好的降脂减肥活性，但这两类物质在荷叶降脂减肥功效中发挥的作用以及两类物质间是否存在协同效应仍需要进一步研究。此外，荷叶中有效成分的提取纯化研究，相关作用靶点的寻找，以及荷叶长期服用的毒副反应研究都有待进一步加强。从化学成分、提取分离、质量评价方法和药理活性等多个方面对荷叶的研究现状进行了综述，希望能为荷叶相关的研究和生产提供科学方面的参考。结合目前研究状况来看，荷叶中有效成分的提取纯化研究、质量控制方法的研究和基于主要药理活性的相关作用靶点确定等方面的研究都有待于加强，以期对荷叶植物资源进行深入研究和合理开发利用。
参考文献：
[1]佟文娟， 张社兵，等. 荷叶生物碱下调THP-1源性巨噬细胞microRNA-33a-5p的表达及上调ABCA1/G1的表达[J]. 中国动脉硬化杂志， 2016， 24（12）：1219-1223.
[2]沈白， 张社兵，等. 荷叶生物碱对THP-1源性巨噬细胞CD36及PPARγ表达的影响[J]. 中国动脉硬化杂志， 2015， 23（8）：784-788.
[3]余里富， 余健. 一种荷叶生物碱提取方法及其应用：， CN105395614A[P]. 2016.
[4]陈曦， 戚进. 荷叶中黄酮和生物碱的研究进展[J]. 中国实验方剂学杂志， 2015（18）：211-214.
[5]李耀中， 孟祥斌. 荷叶中总黄酮总生物碱及叶重变化规律的研究[J]. 中国现代药物应用， 2015， 9（22）：278-279.
[6]马亚琼， 赵永强等.莲属不同组织中的花青素类成分和非花青素类的黄酮成分：， CN105254563A[P]. 2016.