【摘 要】
：
目的 快速筛选HIV-1 P24抗原适配子,并验证其特异性与亲和力.方法 利用聚碳酯材料PCR板包被P24抗原,在PCR板中运用SELEX技术进行适配子筛选.对多条适配子序列进行了一级结构及二级结构软件分析.酶联免疫法(ELISA)对筛选到的适配子进行亲和力及特异性验证.结果 确定用聚碳酯材料可以包被P24抗原,ELISA法检测抗原包被浓度与吸光度(A值)正相关；电泳显示适配子得到富集筛选；测序后
【机 构】
：
100052北京,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肿瘤室,传染病预防控制国家重点实验室,100052北京,中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肿瘤室,传染病预防控制国家重点实验室,100052北京
论文部分内容阅读
目的 快速筛选HIV-1 P24抗原适配子,并验证其特异性与亲和力.方法 利用聚碳酯材料PCR板包被P24抗原,在PCR板中运用SELEX技术进行适配子筛选.对多条适配子序列进行了一级结构及二级结构软件分析.酶联免疫法(ELISA)对筛选到的适配子进行亲和力及特异性验证.结果 确定用聚碳酯材料可以包被P24抗原,ELISA法检测抗原包被浓度与吸光度(A值)正相关；电泳显示适配子得到富集筛选；测序后软件分析表明多条适配子有共有序列,空间结构多样；用ELISA法,结合辣根过氧化物酶(HRP)标记链霉亲和素(SA)与生物素标记的适配子,对适配子与P24的亲和力进行验证,表明筛选到的适配子与P24抗原有特异性的高亲和力结合.结论 建立了一种简便的筛选HIV-1 P24抗原适配子的方法,筛选到特异性的高亲和力P24适配子。
其他文献
目的 构建干扰素λ1表达载体PCI-dhfr-λ1和连接增强子SP163的表达载体PCI-dhfr-SP163-λ1,并在CHO(dhfr-)细胞中表达.方法 在合成的干扰素λ1基因中引入相应酶切位点,并通过融合PCR获得连接增强子SP163-λ1基因,测序正确后将该基因插入表达载体PCI-dhfr,构建重组表达载体PCI-dhfr-λ1和PCI-dhfr-SP163-λ1.将所构建的重组表达载体
目的 构建含有H1N1亚型流感病毒NA基因的重组杆状病毒.方法 用PCR方法扩增甲型H1N1亚型流感病毒(A/PR8/34)全长神经氨酸酶基因,并将其连接于pFastBacdual载体,构建杆状病毒转移载体pFBD-NA.转化含有Bacmid的DH10B感受态细胞后,获得重组穿梭载体rBacmid-NA.将其转染昆虫细胞sf9,获得重组病毒rBac-NA.提取重组杆状病毒rBac-NA的DNA并使
目的 探讨乙肝产妇母乳喂养的安全性检测评价指标.方法 荧光定量PCR检测252例乙肝产妇的血清及乳汁HBV DNA.结果 乙肝产妇血清与乳汁的HBV DNA总阳性率无统计学差异(P＞0.05),双阳乙肝产妇血清及乳汁HBV DNA阳性率明显高于单阳乙肝产妇(P＜0.01).结论 同时检测HBeAg、血清及乳汁的HBV DNA对指导乙肝产妇母乳喂养有重要意义。
目的 探讨基因1b型慢性丙型肝炎患者NS5A区基因变异与聚乙二醇干扰素α-2a(PEG-IFNα-2a)联合利巴韦林(RBV)抗病毒治疗疗效的关系.方法 回顾性选择15例应用PEG-IFNα-2a/RBV抗病毒治疗的基因1b型慢性丙型肝炎患者,其中7例为快速应答(RVR),8例为无应答(NR),应用RT-PCR法扩增NS5A全长片段,用克隆测序方法进行核苷酸和氨基酸序列测定.结果 没有发现与治疗应
A 癌，鳞状细胞安阳地区不同食管鳞癌标本HPV感染率的比较研究（曲鹏，李劲涛，王立东等）（1）：34唇鳞状细胞癌患者人乳头瘤病毒感染的检测分析（魏炜，张宝云，宋韫韬等）（5）：356
目的 对云南省采集的8份EV71标本进行分离鉴定,进行生物学特征分析.方法 采集HFMD息儿的标本,然后使用RT-PCR法进行鉴定,对鉴定为阳性的标本进行病毒分离,分离得到的病毒株在Vero细胞中培养,并进行VP1基因测序.用病毒免疫小鼠,免疫后血清进行中和试验和交叉保护试验.结果 8份标本均为EV71,并均在Vero细胞中都表现出细胞病变；部分免疫血清效价可高达1:10 000以上.结论 8株病
目的 研究In-Fusion技术在HBV全进组克隆中的应用,并分析所获得的的序列信息.方法 在浙江杭州地区收集23份慢性乙型肝炎患者血清,提取病毒核酸,分别设计PCR引物扩增病毒基因组和pMD18T载体,采用In-Fusion方法构建基因组测序质粒,并对序列进行分析.结果 成功扩增出了23条HBV基因组序列,向NCBI提交的24株HBV全长序列,测序结果分析显示,B基因型11例,C基因型12例,没
目的 应用两组三重PCR方法检测非O157:H7型STEC的6种毒力基因stx1、stx2、eae、hly、etpD、katP.方法 对多重PCR方法进行改进优化,引入SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR熔解曲线分析的方法提高工作效率,并结合血清学分析的方法判定结果.建立检测产志贺毒素大肠埃希菌毒力基因的多重PCR方法,简化其分子危害性评估工作,提高检测的准确性与评估效率.结果 用模拟样品评估该
依据病毒学和生物化学参数,可将慢性乙肝自然史划分为免疫耐受期(Ⅰ期)、免疫清除期(Ⅱ期)以及免疫无活性乙肝病毒非复制期(Ⅲ期).有时患者会进入一个乙肝e抗原(HBeAg)血症消失而病毒血症出现以及慢性活动性肝炎发展的时期,即HBeAg阴性的HBV复制期(Ⅳ期),表征着前核心区(pre-core)突变株的出现[1].四个时期并不是必须全部出现在某一患者身上,也不是必须按顺序出现。
目的 建立扩增受阻突变检测系统(ARMS)检测乙型肝炎病毒(HBV)基因型方法,并对慢性乙型肝炎(CHB)患者HBV基因型进行分析.方法 通过对HBV全基因组序列比对分析,设计ARMS特异性引物和探针体系,建立检测HBV B和C基因型方法,对50例临床标本进行检测.结果 50例临床样本中,B型的检出率为26％(1 3例),C型为74％(37例),其实验结果与测序结果完全一致.常州及周边地区乙型肝炎