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目的建立复方灵芝乳膏中王不留行黄酮苷含量测定方法。方法采用HPLC法,色谱柱为Diamonsil-C18（4.6 mm×250 mm,5μm）,流动相为甲醇-0.3%磷酸溶液,梯度洗脱;进样量20μl;检测波长：280 nm;柱温：30℃。结果建立的HPLC方法能使王不留行黄酮苷得到很好的分离,且重复性、精密度、线性关系良好。结论建立的HPLC法能准确测定复方灵芝乳膏中王不留行黄酮苷的含量,方法简便,结果准确。