【摘 要】
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将已构建好的表达载体pPIC3．5K／PAE转化毕赤酵母KM71，经甲醇诱导表达弹性蛋白酶，通过对发酵条件的初步优化，确定毕赤酵母重组菌株表达的最佳条件为：甲醇浓度1％，最佳诱导时间4d。通过D
【机 构】
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河北农业大学食品科技学院,中国农业大学食品科学与营养工程学院
【基金项目】
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国家“863”计划项目(2006AA10Z440);农业部“948”项目(2007-Z8)
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将已构建好的表达载体pPIC3．5K／PAE转化毕赤酵母KM71，经甲醇诱导表达弹性蛋白酶，通过对发酵条件的初步优化，确定毕赤酵母重组菌株表达的最佳条件为：甲醇浓度1％，最佳诱导时间4d。通过DEAE．SepharoseFF弱阴离子交换柱一步纯化，获得良好的纯化效果。该重组蛋白酶最适pH值范围6．0-8．5，最适温度范围为25～40℃，催化反应条件温和。Ca^2＋和Mg^2＋对重组弹性蛋白酶活性有不同程度的促进作用，Zn^2＋、Cd^2＋、Mn^2＋、Fe^2＋、Co^2＋、Cu^2＋和EDTA对该酶有不
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