【摘 要】
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目的探讨14-3-3γ蛋白对鱼藤酮诱导PC12细胞损伤的保护作用及其机制。方法用腺病毒载体携带人14-3-3γ基因(Ad/14-3-3γ)感染PC12细胞,基因转移成功后,用鱼藤酮处理细胞。流
【机 构】
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广西医科大学第一附属医院神经内科,海南医学院附属医院神经内科
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目的探讨14-3-3γ蛋白对鱼藤酮诱导PC12细胞损伤的保护作用及其机制。方法用腺病毒载体携带人14-3-3γ基因(Ad/14-3-3γ)感染PC12细胞,基因转移成功后,用鱼藤酮处理细胞。流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫荧光双标法检测14-3-3γ蛋白与LRRK2(leucine-rich repeat protein kinase 2)的相互作用,免疫印迹技术检测14-3-3γ蛋白及LRRK2的Ser910及Ser935磷酸化水平。结果 Ad/14-3-3γ基因转入PC12细胞后14-3-3γmRNA及蛋白均能过表达。14-3-3γ过表达能增加LRRK2的Ser910及Ser935磷酸化水平及与LRRK2的相互作用,降低PC12细胞的凋亡率(正常对照组4.26%±1.39%,鱼藤酮组36.20%±2.18%,Ad/14-3-3γ组12.78%±2.96%)。结论 14-3-3γ蛋白过表达可能通过抑制LRRK2的去磷酸化,保护鱼藤酮诱导的多巴胺能细胞损伤。
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