【摘 要】
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[目的]探讨黄岑苷对子痫前期大鼠胎盘组织滋养细胞增殖侵袭的影响及相关的作用机制.[方法]选择36只健康清洁级SD大鼠,其中雌性24只,雄性12只,按照2:1比例安排雌雄合笼,24只雌鼠妊娠第13天建立子痫前期大鼠模型,成功20只.从建模成功雌鼠中随机取5只进行原代滋养细胞分离、培养及传代,倒置显微镜下观察滋养细胞形态,以免疫荧光染色法鉴定滋养细胞纯度,四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测吸光度(optical density,OD)值,评估胎盘滋养细胞增
【机 构】
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漯河市中心医院 河南,漯河 462000
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[目的]探讨黄岑苷对子痫前期大鼠胎盘组织滋养细胞增殖侵袭的影响及相关的作用机制.[方法]选择36只健康清洁级SD大鼠,其中雌性24只,雄性12只,按照2:1比例安排雌雄合笼,24只雌鼠妊娠第13天建立子痫前期大鼠模型,成功20只.从建模成功雌鼠中随机取5只进行原代滋养细胞分离、培养及传代,倒置显微镜下观察滋养细胞形态,以免疫荧光染色法鉴定滋养细胞纯度,四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测吸光度(optical density,OD)值,评估胎盘滋养细胞增殖活性.将其余15只建模成功雌鼠分为对照组(以0.3 mL蒸馏水灌胃)、黄岑苷低剂量组(以25μg·mL-1黄岑苷灌胃)、黄岑苷高剂量组(以100μg·mL-1黄岑苷灌胃),灌胃后取腹主动脉血;同时将原代滋养细胞分为A组、B组、C组,分别以对照组、黄岑苷低剂量组、黄岑苷高剂量组大鼠血清培养48 h,采用Transwell法检测各组滋养细胞侵袭能力,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,Real-time qPCR)法检测微小RNA-30d(microRNA-30d,miR-30d)、神经胶质细胞缺失同源物-1(glial cells missing homolog-1,GCM-1)mRNA表达水平,免疫印迹法检测GCM-1蛋白相对表达量.[结果]胎盘滋养细胞经消化、传代后,倒置显微镜下观察呈上皮样细胞形态,多为长多边形,体积大,核大呈卵圆形,呈片状延展生长,贴壁后呈铺路石样;滋养细胞纯度(90.65±5.64)％.与空白组比较,20、40、60、80、100μg·mL-1黄岑苷组OD值增高(P<0.05).与A组比较,B组、C组侵袭细胞数增多,miR-30 d表达水平降低,GCM-1 mRNA及蛋白相对表达量升高(P<0.05);与B组比较,C组侵袭细胞数增多,miR-30 d表达水平降低,GCM-1 mRNA及及蛋白相对表达量升高(P<0.05).[结论]黄岑苷可提升子痫前期大鼠胎盘滋养细胞增殖、侵袭能力,作用机制可能与抑制miR-30d表达、上调GCM-1蛋白表达有关.
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