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目的：建立以HPLC法测定两性霉素B滴眼液中两性霉素B含量的方法。方法：Shim—pack VP—ODS色谱柱（150mm×4．6mm，5μm），流动相为5mmol／LEDTA-乙腈-甲醇（30：25：60）；流速为1．2ml／min，检测波长为408nm，柱温为25℃。结果：两性霉素B在10～80μg／ml范围内线性关系良好（r=0．9999），平均回收率为98．51％。结论：本方法简单、准确，重现性、分离效果好，可用于两性霉素B滴眼液的质量控制。