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动物转基因的关键限制因素是制备效率和基因表达的精确调控。综述了近年发展的提高转基因效率的非定点整合转基因方法,如睾丸转基因法和卵巢转基因法;提高转基因精确性的定点整合转基因的基因打靶法;调控外源基因表达的时空表达和可控表达转基因策略;通过转基因对特定基因的进行表达时空和可逆的RNA干扰灵活精细调控。对这些新的转基因方法的优缺点进行了讨论,并探讨如何利用这些方法进行转基因动物的制备。