【摘 要】
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目的建立荧光定量PCR检测弓形虫基因的方法,并进行实验室方法学评价.方法 PCR扩增弓形虫529bp重复序列,经TA克隆后转化入大肠杆菌DH5α中;提取重组质粒鉴定后,作为模板建立荧
【机 构】
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重庆医科大学检验系临床微生物学教研室
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目的建立荧光定量PCR检测弓形虫基因的方法,并进行实验室方法学评价.方法 PCR扩增弓形虫529bp重复序列,经TA克隆后转化入大肠杆菌DH5α中;提取重组质粒鉴定后,作为模板建立荧光定量PCR标准曲线,并做重复性试验和临床标本检测.结果用重组质粒制作的标准曲线循环阈值与模板浓度有良好的线性关系,相关系数0.995,平均试验间变异系数3.28%,无非特异性扩增.临床标本检测阳性率为43.3%.结论建立了检测弓形虫基因的荧光定量PCR方法,快速、灵敏、特异的特点适合临床实验室的应用.
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