【摘 要】
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目的：用缺口修复等技术构建Myostatin（肌肉生长抑制素,MSTN）基因打靶载体,并对大白猪胎儿成纤维体细胞进行转染,获得基因敲除细胞。方法与结果：首先构建用于MSTN基因同源长臂（LA）的
【机 构】
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云南农业大学动物科学技术学院,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,军事医学科学院生物工程研究所,河北农业大学动物科学技术学院
【基金项目】
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农业部畜禽遗传资源与利用重点实验室开放课题（20090601）
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目的：用缺口修复等技术构建Myostatin（肌肉生长抑制素,MSTN）基因打靶载体,并对大白猪胎儿成纤维体细胞进行转染,获得基因敲除细胞。方法与结果：首先构建用于MSTN基因同源长臂（LA）的抓捕载体,然后在大肠杆菌内利用Red同源重组系统介导的缺口修复,从含大白猪MSTN基因座的细菌人工染色体上亚克隆9.9 kb的LA到抓捕载体上,经过部分序列测定,同源性为100%;通过PCR获得1.4 kb的同源短臂（SA）;将LA和SA连入载体pLOXP,构建含有neo和tk正负筛选标记基因的MSTN基因打靶载体
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