牛透明质酸酶PH-20核心区在毕赤酵母中的高效表达

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目的利用毕赤酵母表达牛源透明质酸酶核心区,以实现透明质酸酶的重组制备。方法将去除信号肽和锚定区域的牛源透明质酸酶PH-20成熟肽编码序列按照毕赤酵母密码子偏爱性进行优化,然后连入pPICZaA表达载体并转入毕赤酵母SMD1168H菌株。0.5%(v/v)甲醇诱导表达72 h后采用3,5-二硝基水杨酸(3,5-dinitrosalicylic acid,DNS)法测定培养液上清中透明质酸酶活性。结果包含PH-20核心序列(1332 bp)的重组酵母经甲醇诱导表达72 h,培养液上清中透明质酸酶活性达135.2 U/mL。结论实现了牛源透明质酸酶基因在毕赤酵母中的高效表达。
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