【摘 要】
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目的利用C57BL/6小鼠探索出一种改良的小鼠滑膜成纤维细胞(SF)的原代培养方法,以方便类风湿关节炎(RA)关于滑膜炎的研究。方法收集小鼠髋关节周围滑膜,去除内含的"蛋黄样"物,
【机 构】
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南方医科大学附属南方医院风湿免疫科,南方医科大学附属南方医院实验中心
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目的利用C57BL/6小鼠探索出一种改良的小鼠滑膜成纤维细胞(SF)的原代培养方法,以方便类风湿关节炎(RA)关于滑膜炎的研究。方法收集小鼠髋关节周围滑膜,去除内含的"蛋黄样"物,将滑膜移入含0.5%Ⅳ型胶原酶的EP管中,剪碎;置入37℃摇箱中振荡消化60min,然后在涡轮振荡仪上振荡1.5min,常规培养。结果细胞培养1周左右。进行第一次传代;大约在培养10d后滑膜巨噬细胞的数量达到最高峰,然后逐渐减少;在第3次传代(15~20d)后,滑膜巨噬细胞基本消失。用Vimentin标记的细胞免疫荧光化学染色显示SF细胞纯度超过95%;用Vimentin和CD90.2标记的流式细胞术显示其纯度达到95%,用CD54标记其纯度大约为80%。结论利用C57BL/6小鼠探索出一种改良的小鼠SF的原代培养方法是一种简便易行的小鼠SF的原代培养方法。
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