通过对三磷酸腺苷(ATP)含量及活性氧(ROS)水平的检测,观察在小鼠卵子受精过程中不同水平的激活强度对卵子线粒体代谢的影响。
方法采用我们已经建立的弱激活力小鼠精子对卵子进行卵胞质内单精子显微注射(ICSI)后,施以不同浓度的离子霉素(0 μmol/L、2.5 μmol/L、10 μmol/L)处理10 min进行辅助激活,并以正常小鼠精子ICSI作为对照。根据处理方式分为4组:正常精子组(normal,N组)、激活力减弱精子(weak sperm,W组)、激活力减弱精子施以适度辅助激活剂组(weak sperm+moderate AOA,M组)、激活力减弱精子施以过度辅助激活剂组(weak sperm+excessive AOA,E组)。在ICSI后1.5~2 h内对卵子内ATP含量和ROS的水平进行检测。对未进行ICSI卵子组(oocyte,O组)进行ATP检测。
结果①ATP含量检测显示:随着激活力的上升,O组[(2.005±0.053) pmol]、W组[(2.485±0.064) pmol]、M组[(3.763±0.075) pmol]的卵子内平均ATP含量逐步提高,且差异有统计学意义(P<0.000 1);其中M组与N组[(3.573±0.068) pmol]平均ATP含量接近(P>0.05);E组虽较O组[(3.204±0.070) pmol]高,但其卵子的平均ATP含量显著小于N组(P<0.001)。②ROS水平检测显示:随着激活力的增加,W组(0.420±0.028,n=9)、M组(1.097±0.037,n=9)、E组(1.361±0.033,n=10)表现出ROS水平的逐步升高(P<0.001),其中M组与N组ROS水平(1.000±0.026,n=10)也比较接近,差异有统计学意义(P=0.044)。
结论受精过程中激活力水平将对卵子线粒体代谢产生明显影响,对弱激活力小鼠精子显微受精后,行适度激活时,ATP产量增加,ROS生成较少;而过高的激活强度反而会引起ATP产量的下降和ROS生成的增多。