【摘 要】
：
目的:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除人肝癌细胞HepG2中的四个半LIM结构域蛋白1(FHL1)基因,构建FHL1基因敲除的HepG2稳定细胞株。方法:根据CRISPR/Cas9靶点设计规则,设计特
【机 构】
：
军事科学院、军事医学研究院生物工程研究所,解放军总医院肝胆外二科
【基金项目】
：
国家自然科学基金(31470773)
论文部分内容阅读
目的:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除人肝癌细胞HepG2中的四个半LIM结构域蛋白1(FHL1)基因,构建FHL1基因敲除的HepG2稳定细胞株。方法:根据CRISPR/Cas9靶点设计规则,设计特异性识别FHL1基因第三外显子相关序列的上下游小向导RNA,构建真核重组表达质粒,测序鉴定后,将重组质粒包装慢病毒感染HepG2细胞,用嘌呤霉素抗性筛选稳定敲除FHL1基因的细胞株,用免疫印迹法鉴定HepG2细胞中FHL1基因的敲除效果,利用生长曲线实验和划痕实验检测基因敲除对细胞生长和迁移的影响。
其他文献
工针对污水处理厂中水池结构的设计应满足抗渗透、抗上浮、防腐蚀等技术要求。首先简要的概述了污水处理厂中水池结构在设计过程中存在的问题,并从结构设计方面分析了出现问
<正>教学设计是解决教学问题的系统方法,是根据教学对象和教学目标,确定合适的教学起点与终点,将教学诸要素有序、优化地安排,形成教学方案的过程。[1]教学主题设计从属于教
小微企业是国民经济活动的重要组成部分,肩负经济振兴和可持续发展之重任。然而融资难、贷款难一直是其成长过程中挥之不去的阴影。扎根于小微企业土壤的广大中小金融机构既
目的建立基于高效液相色谱-紫外（HPLC-UV）和高效液相色谱-多级离子阱质谱分析（HPLC-ITMS/MS）的海洋天然产物体外抑制COX-2酶的活性评价方法。方法采用Agilent Poroshell 120C18色
节能减排、环境保护是我国可持续发展战略的重要环节。烟气脱硫是燃煤电厂必须实施的技术措施。脱硫废水作为燃煤电厂脱硫工艺产生的重要污染源是燃煤电厂必须解决的实际问题。减少脱硫废水对环境的污染,对燃煤电厂实现废水“零排放”具有重要意义。本文以实际运行中的首阳山2 X 630MMW燃煤电厂的脱硫废水处理系统为研究对象,通过文献检索、工程调研、试验分析、理论分析和工程应用等方法,对首阳山燃煤电厂的脱硫废水处
目的探讨老年不典型甲亢的临床特征。方法选取2014年1月—2015年12月来该所就诊的不典型老年甲亢97例患者(观察组)与同期症状典型的老年甲亢94例患者(对照组)的临床资料,进行
目的：探讨四周中低强度有氧运动对肥胖青少年血液流变学的影响。方法：以参加青少年暑期减肥运动营的肥胖青少年40名（男20名,女20名）为对象,测定身体形态指标和血液流变学指标,制
<正>自从2001年以来,广大秦沈客运专线的参与者和未参与者,在铁道部科技司、高速办的带领下,以极大的热情投身于铁路客运专线的施工准备工作。在京沪高速铁路尚未立项,而9条
<正>办园理念是一所幼儿园办园思想的集中体现,是幼儿园对一定教育价值的追求,对幼儿园的办学目标和发展方向有着引领的作用。每个幼儿园,不管创办时间长短,都会有自己的文化
在教学实践中,教师对于信息技术与数学教学的整合已经有了许多宝贵的尝试,教师和学生正在体验着信息技术进入教学带来的新奇和喜悦。但是,无论是在理念层面还是在操作层面,都