重组质粒pEGFP-C3-HCVc的构建及在RBE细胞中的表达

来源 :广州医药 | 被引量 : 0次 | 上传用户：xjqlhh0621

【摘要】

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目的构建重组p EGFP-C3-HCVc真核表达载体,并建立稳定表达HCVc基因的肝内胆管癌细胞株RBE-core。方法采用PCR钓取目的基因HCVc,并克隆入p EGFP-C3的多克隆位点,构建p EGFP-C3

【作者】

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曾兵蔡灿锋辛海洋周泉波周佳佳程帝曾军唐超明

【机构】

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广州医科大学附属第六医院普外科,中山大学孙逸仙纪念医院胆胰外科

【出处】

：

广州医药

【发表日期】

：

2016年5期

【关键词】

：

HCVc 肝内胆管癌 RBE Hepatitis C Virus core protein Intrahepatic cholangiocarcinoma RB

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目的构建重组p EGFP-C3-HCVc真核表达载体,并建立稳定表达HCVc基因的肝内胆管癌细胞株RBE-core。方法采用PCR钓取目的基因HCVc,并克隆入p EGFP-C3的多克隆位点,构建p EGFP-C3-HCVc重组质粒。经过双酶切及测序验证后,采用脂质体将p EGFP-C3-HCVc质粒转染到RBE细胞中,经2周G418（200μg/m L）筛选后进行单克隆挑选及扩大培养,建立稳定表达HCVc的胆管癌细胞株RBE-core。采用RT-PCR和Western blot验证HCVc在RBE-co

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