【摘 要】
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目的 观察白噬在血管抑制药物贝伐单抗诱导的肺癌A549细胞凋亡中的作用.方法 设置空白对照组、贝伐单抗(16μmol/L)组、3-甲基腺嘌呤(3-MA,8μmol/L)组和3-MA+贝伐单抗组4个实验组.收集各实验组细胞组,膜联蛋白Ⅴ-异硫氰酸荧光素(Annexin Ⅴ-FITC)和单丹磺酰戊二胺(MDC)染色后,荧光显微镜下定性观察荧光表达;流式细胞术定量检测细胞凋亡、Westernblot检测
【机 构】
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473009南阳市中心医院胸外科,郑州大学第一附属医院胸外科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室郑州市胸部肿瘤重点实验室,473009南阳市中心医院胸外科,473009南阳市中心医院胸外科,郑州大
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目的 观察白噬在血管抑制药物贝伐单抗诱导的肺癌A549细胞凋亡中的作用.方法 设置空白对照组、贝伐单抗(16μmol/L)组、3-甲基腺嘌呤(3-MA,8μmol/L)组和3-MA+贝伐单抗组4个实验组.收集各实验组细胞组,膜联蛋白Ⅴ-异硫氰酸荧光素(Annexin Ⅴ-FITC)和单丹磺酰戊二胺(MDC)染色后,荧光显微镜下定性观察荧光表达;流式细胞术定量检测细胞凋亡、Westernblot检测自噬相关蛋白Beclin 1和微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达.结果 (1)作用48 h,贝伐单抗对A549细胞的半数抑制浓度(IC50)为16 μmol/L,3-MA对A549细胞抑制率10％的浓度(IR10)为8μmol/L; (2)与单用贝伐单抗[(43.92±1.38)％]比较,3-MA联合贝伐单抗显著增加了细胞凋亡率[(87.46±5.97)％,P＜0.01],Beclin l和LC3的表达显著下调(P＜0.05).结论 3-MA可能是通过抑制白噬信号通路,显著增加了贝伐单抗诱导的肺癌细胞凋亡。
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