转移相关基因干扰对肝癌转移潜能的影响

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目的通过干扰高转移潜能肝癌细胞(MHCC97-H)中的骨桥蛋白(OPN)、肿瘤增殖性因子肿瘤生长因子β1(TGFβ1)基因,使之减少OPN、TGFβ1表达,观察MHCC97-H转移能力的变化情况。方法对MHCC97-H细胞行OPN、TGFβ1基因干扰,q PCR法检测干扰效果。MHCC97-H细胞迁移细胞学实验采用transwells法。肺转移动物模型制作方法:裸鼠尾静脉注射各组细胞,含细胞数5×10~6个/只,隔天连续注射3次,2周后观察肺脏组织。离体肺脏组织标本制作,DAPI染核处理10 min,甘油PBS封片,置于荧光显微镜下观察。免疫荧光法检测裸鼠动物模型整合素αvβ3表达。结果经基因干扰后MHCC97-H表达OPN和TGFβ1明显降低(P<0.05)。细胞学实验显示与对照组比较,经OPN和TGFβ-1干扰组MHCC97-H细胞迁移数量明显减少(P<0.01)。动物模型实验显示与对照组比较,OPN和TGFβ1干扰组肺组织中肝癌细胞较少,定量分析显示OPN和TGFβ1干扰组肺脏组织中肝癌细胞IOD值明显低于对照组(P<0.05)。OPN和TGFβ1干扰组与对照组比较整合素αvβ3表达IOD值差异无统计学意义(P>0.05)。结论经OPN和TGFβ1基因干扰的MHCC97-H细胞肺转移能力有明显的下降,尤其是TGFβ1基因干扰组下降更加明显,但经OPN和TGFβ1基因干扰的MHCC97-H细胞表达整合素αvβ3能力无变化,整合素αvβ3介导参与了OPN和TGFβ1共同作用肝癌转移行为的变化。
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