观察支气管哮喘(哮喘)患儿和哮喘小鼠外周血单个核细胞(PBMC)中T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白-3(Tim-3) mRNA的表达,探讨Tim-3在哮喘中的作用。
方法选取2012年1月至2013年6月于武汉市妇女儿童医疗保健中心呼吸内科住院或哮喘门诊患儿97例,哮喘发作期47例(哮喘发作组),哮喘缓解期50例(哮喘缓解组),健康体检儿童42例为健康对照组。检测3组儿童PBMC中Tim-3 mRNA的表达,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血浆中白细胞介素-6(IL-6)、转化生长因子-β(TGF-β)的水平,并分析Tim-3 mRNA与IL-6水平的相关性,同时建立小鼠哮喘动物模型,分为正常对照组和哮喘组,每组10只,应用实时荧光定量PCR检测小鼠PBMC中Tim-3 mRNA的水平,流式细胞分析技术检测CD4细胞中IL-17细胞比例反映Th17的水平,CD4细胞中CD25+FoxP3+反映调节性T淋巴细胞(Treg)的水平;并分析Tim-3的表达与Th17/Treg水平的相关性。
结果儿童哮喘发作组PBMC中Tim-3 mRNA吸光度值高于哮喘缓解组和健康对照组(P均<0.05),儿童哮喘发作组血浆中IL-6水平高于哮喘缓解组和健康对照组(P均<0.05),动物模型中哮喘组PBMC中Tim-3 mRNA的水平高于正常对照组(P<0.01),哮喘组CD4+IL-17+表达比例高于正常对照组,而CD4+CD25+FoxP3+低于正常对照组(P均<0.05),哮喘组Th17/Treg的比值高于正常对照组(P<0.05),哮喘组PBMC中Tim-3 mRNA的表达水平与CD4+IL-17+及Th17/Treg的比例呈正相关,与CD4+CD25+FoxP3+的水平呈负相关。
结论哮喘患儿PBMC中Tim-3 mRNA表达增高,参与IL-6相关的呼吸道炎性反应。动物实验提示Tim-3与Th17/Treg失衡密切相关,表明Tim-3可能在哮喘的发生、发展中起着一定的作用。