乌骨鸡肠乳杆菌的分离鉴定及体外抑菌试验

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[目的]寻找能在禽类生产实践中替代抗生素的益生菌,以提高乌骨鸡生产性能,减少抗生素的使用,对乌骨鸡肠道黏膜进行细菌分离鉴定及体外抑菌试验.[方法]利用常规理化法做生理生化试验;PCR扩增测序法进行分子生物学鉴定;牛津杯琼脂扩散法做体外抑菌试验;灌喂乳酸菌法做动物安全性试验.[结果]分离菌株生长迅速、产酸强,有明显透明溶钙圈,为革兰氏阳性短杆菌;能发酵乳糖、七叶苷等,不分解木糖、阿拉伯糖;甲基红(M-R)试验结果为阳性,H2S、氧化酶、乙酰甲基甲醇(V-P)等均为阴性,生理生化特性与乳酸杆菌基本一致;PCR扩增在约1500 bp处出现目的条带,16S rDNA基因测序显示分离菌与唾液乳酸杆菌的同源性最高;分离菌对新生霉素高度敏感,对诺氟沙星耐药;对大肠杆菌、链球菌等病原菌均表现明显的抑菌作用;分离菌发酵液呈酸性时才具有抑菌活性,蛋白酶、高温对分离菌发酵液抑菌活性影响不大;动物试验中小鼠均生长良好,无一死亡.[结论]分离菌均为唾液乳杆菌,具备成为益生菌的优势;分离菌对多种病原菌具有抑制作用,与诺氟沙星等配合使用,可防治由大肠杆菌、链球菌等多种病原指示菌引起的疾病.
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