全反式维甲酸对大鼠肾小管上皮细胞缺氧性损伤保护作用的体外研究

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目的 探讨全反式维甲酸(atRA)对大鼠肾小管上皮细胞缺氧性损伤的保护作用及其相关机制.方法 对大鼠肾小管上皮细胞进行体外培养,根据研究需要分四组,分别为对照组、CoCl2刺激组、atRA刺激组以及CoCl2与atRA共同刺激组,做如检测:用凝胶电泳迟滞分析(EMSA)测定各组别细胞NFκB活性,用qRT - PCR和Western blo分别检测各组别细胞NFκB亚单位p65,Scpep1、VEGF mRNA与蛋白表达水平,用免疫共沉淀检测NFκB亚单位p65与Scpep1相互作用.结果 CoCl2刺激组中VEGF mRNA与蛋白水平的表达明显高于对照组(P<0.01).atRA刺激组中VEGF的mRNA与蛋白水平表达明显低于对照组(P <0.05).CoCl2刺激组中p65 mRNA与蛋白水平的表达明显高于对照(P<0.01).atRA刺激组中VEGF 的mRNA与蛋白水平表达明显低于对照组(P<0.05).共同刺激组中p65的表达受到抑制,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).CoCl2刺激组中NFκB的DNA结合力明显高于正常组(P<0.01).而atRA刺激组中NFκB的DNA结合力受到显著抑制,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05).在共同刺激组,NFκB的活性同样受到抑制,与对照组比,差异有统计学意义(P<0.05).atRA刺激组中Scpep1mRNA与蛋白水平的表达水平显著高于对照组(P<0.01).与对照组比较,CoCl2刺激组中Scpep1的mRNA与蛋白水平表达无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05).免疫沉淀结果显示,p65与Scpep1存在相互关联.结论 atRA通过Scpep1对NFκB复合物形成及其活性产生抑制效应,从而减弱VEGF的表达,对缺氧性损伤的肾小管上皮细胞发挥保护作用.
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