【摘 要】
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为了理解苹果类黄酮代谢的分子机制,以富含类黄酮‘变叶海棠,苹果幼叶为材料,利用SMART法构建一个苹果叶片全长cDNA文库.初级文库滴度为2.28×104 cfu/mL,库容为3.30×106个
【机 构】
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农业部园艺作物种质资源利用重点实验室,中国农业科学院果树研究所
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为了理解苹果类黄酮代谢的分子机制,以富含类黄酮‘变叶海棠,苹果幼叶为材料,利用SMART法构建一个苹果叶片全长cDNA文库.初级文库滴度为2.28×104 cfu/mL,库容为3.30×106个独立克隆,重组率100％,插入片段平均长度大于1.5 kb.并对随机取16个重组子进行测序,经分析完整全长cDNA为7条.并从测序中获得一个查尔酮合酶(Chalcone sythase,CHS)基因,该基因cDNA全长1548 bp,有一个1170 bp的开放阅读框,编码含389个氨基酸残基的蛋白,蛋白的理论分子质量为42.44 KDa,等电点5.65,该基因与已知苹果CHS基因高度同源.并构建该基因植物表达载体,用冻融法将其导入根癌农杆菌EHA105.
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