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目的：研究B结构域糖基化位点对凝血因子Ⅷ分泌和活性的影响。方法：通过反向PCR技术在凝血因子ⅧA2和A3结构域之间插入B结构域的糖基化序列,PCR后进行重组连接、质粒转化、克隆筛选、质粒抽提等步骤,构建重组人凝血因子Ⅷ载体,然后再通过活性检测试剂盒检测胞外分泌因子Ⅷ活性,用ELISA（双抗体夹心法）检测胞外分泌因子Ⅷ总表达,用Western印迹检测重组因子Ⅷ在胞内的总表达。结果：B结构域糖基化点的增加使得因子Ⅷ的胞外相对活性最高提高了1倍。结论：糖基化位点的加入可以增强因子Ⅷ的胞外活性,如果适当增加糖基化