利用反向PCR方法扩增细菌热激蛋白HSP60基因

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【摘要】

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利用PCR简并引物扩增出HSP60基因中一段约600bp的核心片段,将该核心片段标记为探针.与基因组DNA进行Southern杂交,选择出适宜的限制性内切酶,以便消化基因组DNA得到大小合适

【作者】

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蹇文婴东秀珠

【机构】

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中国科学院微生物研究所

【出处】

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微生物学报

【发表日期】

：

2002年1期

【关键词】

：

反向PCR 热激蛋白HSP60 双歧杆菌加德纳氏菌基因扩增 Inverse PCR Heat Shock Protein 60 Gene Bifidob

【基金项目】

：

国家自然科学基金

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利用PCR简并引物扩增出HSP60基因中一段约600bp的核心片段,将该核心片段标记为探针.与基因组DNA进行Southern杂交,选择出适宜的限制性内切酶,以便消化基因组DNA得到大小合适的、含有HSP60基因的酶切片段.将酶切片段自身环化后作为模板进行反向PCR引物的延伸方向自核心片段出发延环化分子向未知序列区进行,可扩增出核心区上下游的序列.应用该方法,扩增并测定了寓齿双歧杆菌( Bifidobacterium denticolens )DSM10105]、奇异双歧杆菌( Bifidobacteri

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