香石竹查尔酮合酶基因的克隆与植物反义表达载体的构建

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根据已发表的查尔酮合酶(CHS)基因的序列,设计一对引物,以香石竹品种Master的总cDNA为模板,扩增出香石竹查尔酮合酶基因全阅读框架序列,以Pgem-T为中间载体,序列检测的结果显示同Henkel,J.等在NCBI的基因库中发表的从香石竹品种"Clove Pink"花瓣中提取的CHS基因全开放阅读框序列一致.将序列反义克隆到双元载体PBI-121上,并导入农杆菌中,经PCR及酶切分析鉴定,结果表明该片段的反义序列已克隆于载体中.
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