【摘 要】
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目的:探究神经纤毛蛋白-1(neuropilin-1)过表达对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导的心衰大鼠心脏功能及心肌组织损伤的保护作用.方法:构建neuropilin-1过表达的腺病毒载体(Ad-neuropilin-1),采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)结合Western blot检测过表达效率;选取60只SD大鼠,随机分为对照(control)组、ISO组、ISO+Ad(阴性对
【机 构】
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三六三医院心血管内科,成都610041;成都市第六人民医院心血管内科,成都610051
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目的:探究神经纤毛蛋白-1(neuropilin-1)过表达对异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)诱导的心衰大鼠心脏功能及心肌组织损伤的保护作用.方法:构建neuropilin-1过表达的腺病毒载体(Ad-neuropilin-1),采用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)结合Western blot检测过表达效率;选取60只SD大鼠,随机分为对照(control)组、ISO组、ISO+Ad(阴性对照)组和ISO+Ad-neuropilin-1组,除control组外各组采用皮下注射ISO制成心衰大鼠模型,检测各组大鼠心脏功能,采用RT-PCR和酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测各组大鼠心损标记物、炎性因子水平,HE染色、缺口末端标记法(TdT-medated dUTP nick end labeling,TUNEL)染色观察心肌细胞凋亡情况,Western blot检测增殖细胞相关抗原Ki-67和半胱天冬酶(cysteine aspartase-3,Cas3)的表达.结果:相比control组,ISO+Ad-neuropilin-1组neuropilin-1 mRNA和蛋白表达均升高(P＜0.05);相比control组,ISO组大鼠心率(heart rate,HR)、左心室射血分数(left ventric-ular ejection fraction,LVEF)、左室短轴缩短率(left ventricular fraction shortening,LVFS)、neuropilin-1、Ki-67蛋白表达水平均明显降低,血清心肌肌钙蛋白(cardiac troponin,cTnI)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB,CK-MB)、一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)mRNA水平、心肌细胞凋亡率、cleaved caspase-3/Cas3水平明显升高(P＜0.05);相比ISO组,ISO+Ad-neuropilin-1组HR、LVFS、LVEF、neuropilin-1、Ki-67蛋白相对表达明显升高,cTnI、CK、CK-Mb、iNOS、IL-10 mRNA及外周血含量、心肌细胞凋亡率、cleaved caspase-3/Cas3水平均明显降低(P＜0.05).结论:neuropilin-1过表达可抑制ISO诱导的心衰大鼠心肌细胞凋亡及炎症反应,改善其心脏功能.
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