【摘 要】
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目的构建靶向YWHAE基因的shRNA慢病毒表达质粒,并验证其对AGS胃癌细胞增殖的影响。方法设计并合成5对针对人YWHAE基因的shRNA序列,分别克隆入pLentiLox3.7（pLL3.7）慢病毒表达质
【机 构】
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福建医科大学消化道恶性肿瘤教育部重点实验室
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目的构建靶向YWHAE基因的shRNA慢病毒表达质粒,并验证其对AGS胃癌细胞增殖的影响。方法设计并合成5对针对人YWHAE基因的shRNA序列,分别克隆入pLentiLox3.7（pLL3.7）慢病毒表达质粒,接着将重组的慢病毒表达质粒和包装质粒PHR、包膜质粒VSVG一起采用磷酸钙法转染293T细胞包装慢病毒,收集制备的慢病毒感染AGS细胞,用抗生素Puromycine进行筛选。Western-blot检测感染细胞YWHAE蛋白的表达。选取干扰效率最高的慢病毒表达质粒,针对性设计siRNA的点突变引物
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