肌糖蛋白TN-C促进人骨髓基质干细胞向成骨细胞的分化

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目的研究肌糖蛋白(Tenascin-c,TN-C)对人骨髓基质干细胞向成骨细胞分化的诱导作用,为TN-C在骨折愈合中的应用提供理论依据。方法用全骨髓培养法获取人骨髓基质干细胞(h BMSCs),第6~10代的细胞用于本研究。体外培养的h BMSCs用自行制备的不同浓度重组TN-C(r TN-C)蛋白处理(0、1、10、50和100 nmol/L),于处理后不同时间进行细胞茜素红染色,检测细胞的矿化;或于不同时间收集细胞总RNA进行RT-PCR检测碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OCN)mRNA水平的变化;同时利用ALP检测试剂盒和骨钙素放射性免疫试剂盒分别检测ALP活性和细胞培养基中OCN含量。结果 1)r TN-C处理h BMSCs 10 d后,r TN-C呈剂量依赖性促进成骨细胞的矿化(P<0.05);2)r TN-C处理h BMSCs后,细胞ALP活性及培养基上清中OCN含量显著高于未处理对照组(P<0.05)。结论肌糖蛋白对人BMSC向成骨细胞的分化有一定的促进作用。
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