【摘 要】
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为原核表达抗伏马菌素单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白并分析其活性,本研究根据抗伏马菌素单链抗体H2的基因序列设计引物,PCR扩增获得目的基因,经限制性核酸内切酶SfiⅠ和NotⅠ的酶切位点克隆到pDAP2/S载体中,转化大肠杆菌(Eschrichia coli)菌株XL1-Blue并鉴定阳性转化子。IPTG诱导H2-AP融合蛋白基因的表达,利用Western blot检测其表达情况,AP显色反应和ELISA鉴定其活性。结果显示成功构建了pDAP2/S-H2原核表达载体,融合蛋白在大肠杆菌中实现可溶性表达,并保
【机 构】
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贵州医科大学,贵州医科大学,贵州医科大学生物与工程学院,贵州医科大学基础医学院
【基金项目】
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国家自然科学基金(21906036,31771014,11762006,31860262),贵州省科技计划项目(黔科合基础[2018]1412,黔科合平台人才[2016]5676,黔科合人才团队[2015]4021,黔科合LH字[2016]7357),贵州省科技支撑项目(黔科合支撑[2019]2787号),贵州医科大学环境污染与疾病监控省部共建教育部重点实验室开放课题基金(黔教合KY字[2017]
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为原核表达抗伏马菌素单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白并分析其活性,本研究根据抗伏马菌素单链抗体H2的基因序列设计引物,PCR扩增获得目的基因,经限制性核酸内切酶SfiⅠ和NotⅠ的酶切位点克隆到pDAP2/S载体中,转化大肠杆菌(Eschrichia coli)菌株XL1-Blue并鉴定阳性转化子。IPTG诱导H2-AP融合蛋白基因的表达,利用Western blot检测其表达情况,AP显色反应和ELISA鉴定其活性。结果显示成功构建了pDAP2/S-H2原核表达载体,融合蛋白在大肠杆菌中实现可溶性表达,并保
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