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采用分步PCR扩增连接的方法将口蹄疫病毒结构蛋白基因P1,非结构蛋白基因2A、2B、3C蛋白酶和3D聚合酶按正确的读码框依次连接克隆入pGEM-T载体.然后,将切取的目的基因亚克隆入杆状病毒转移载体pMelBacB.构建成功的重组pMelBacB/P12X3C3D转移载体经测序鉴定,含有完整的目的基因表达盒,转移载体可与杆状病毒骨架载体进行昆虫sf9细胞内同源重组,以产生重组杆状病毒.