【摘 要】
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应用RT-PCR技术从白鲢垂体mRNA中扩增出GH全长cDNA片段,长度1.2kb.将1.2kb白鲢GHcDNA克隆到载体质粒 pBluescriptKSⅡ+(pBSKSII+)中,构建了pBS-scGHcDNA克隆;通过含有NdeI酶
【机 构】
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中国水产科学研究院黄海水产研究所,Biocenter of University Wuerzburg
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应用RT-PCR技术从白鲢垂体mRNA中扩增出GH全长cDNA片段,长度1.2kb.将1.2kb白鲢GHcDNA克隆到载体质粒 pBluescriptKSⅡ+(pBSKSII+)中,构建了pBS-scGHcDNA克隆;通过含有NdeI酶切位点的特异引物扩增出不含信号肽序列的cDNA片段,将其重组到pRSET5b载体质粒中,构建了白鲢GHcDNA表达质粒pRSET-scGH.将此表达质粒转化BL21(DE3)大肠杆菌,经IPTG诱导后,在转化的大肠杆菌中检测到GH蛋白的存在.Western印迹表明该蛋白带与草鱼GH单克隆抗体具有强烈的免疫反应.
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