背景 穿透角膜移植术后发生排斥反应是手术失败的主要原因,尤其是存在高危排斥反应条件的患者.以往对角膜移植排斥反应发生机制的研究主要集中于角膜缘和角膜新生血管(CNV)方面,但目前发现,这些因素并不能解释所有角膜植片排斥现象.研究发现,虹膜睫状体组织内存在免疫细胞,但其与角膜植片排斥反应的关系尚不清楚. 目的 研究穿透角膜移植术后虹膜睫状体的血管变化情况. 方法 将8周龄清洁级BALB/c小鼠70只分为同种异体角膜移植组60只和空白对照组10只.角膜移植组以C57BL/6小鼠角膜作为供体,BALB/c小鼠作为受体,行穿透角膜移植术.术后每天裂隙灯显微镜下观察并记录角膜植片混浊情况,并按Hegde的标准进行评分.分别于术后5d、10 d和发生排斥时选取各组小鼠,处死后收集虹膜睫状体标本,分别应用免疫组织化学法和逆转录PCR(RT-PCR)法检测虹膜睫状体中跨膜蛋白occludin、胞质附着蛋白-1(ZO-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、主要组织相容性复合体Ⅱ(MHCⅡ)、趋化因子受体(CCR5、CCR7)及其mRNA在各组小鼠虹膜睫状体组织中的表达,用Image J图像分析软件计算虹膜睫状体组织铺片中上述各因子阳性细胞的数量(个/视野)以及RT-PCR中目的基因的吸光度(A)值. 结果 角膜植片平均存活时间为(17±3)d,术后5d角膜植片评分平均为0.6,术后10d平均评分为0.5,术后18d平均评分为3.3.正常小鼠虹膜睫状体组织中可见大量ZO-1蛋白表达,排斥反应时可见ZO-1蛋白表达明显减少.正常小鼠虹膜睫状体组织中未见MMP-9的表达,角膜移植术后免疫排斥反应时可见大量MMP-9的表达,呈红色荧光.虹膜睫状体组织铺片免疫荧光染色显示,角膜移植术后免疫排斥反应时MHCⅡ+细胞数量较正常小鼠明显增加,分别为(4021.83±495.18)和(1559.67±350.29)个/视野,差异有统计学意义(P=0.000).与正常小鼠相比,角膜移植术后发生免疫排斥反应时ZO-1 mRNA、occludin mRNA表达均降低,A值分别为36.74±3.13 vs.110.11±11.88及57.54±3.41 vs.59.90±3.50,差异均有统计学意义(P＜0.05),而MMP-9 mRNA、CCR5 mRNA、CCR7 mRNA的表达显著增加,A值分别为20.29±1.19 vs.2.77±0.85、35.43±2.56 vs.9.11±0.29、60.83±0.87 vs.0.89±0.95,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 穿透角膜移植术后发生免疫排斥反应时虹膜睫状体中血管通透性明显增加,同时伴有大量抗原递呈细胞的聚集。