目的:探讨HPV16E7蛋白表达对TNF-α诱导的食管癌细胞凋亡的作用及其机制。方法:构建HPV16E7蛋白高表达的食管癌细胞系KYSE150,药物处理后利用流式细胞学检测及PARP蛋白的切割来鉴定细胞凋亡。蛋白质印迹法检测代表AKT活性的AKT473位丝氨酸磷酸化水平,荧光素酶报告基因实验检测Survivin的转录活性。结果:TNF-α与放线菌素D可以诱导食管癌细胞KYSE150发生细胞凋亡。空载细胞的细胞凋亡率从0h的1.2%增加到10h的12.1%和20h的26.5%;E7高表达的KEYE150细胞凋亡率从0h的2.5%增加到10h的20.9%和20h的40.5%。与空载相比,HPV16E7表达的细胞凋亡率明显增多,在处理20h后E7表达的KYSE150细胞凋亡率为对照细胞的1.53倍。HPV16E7高表达的KYSE 150细胞PARP的116×103条带弱于对照细胞,而89×103条带则明显强于对照组。KYSE150GFP-E7细胞AKT143丝氨酸磷酸化水平仅为对照细胞的57.4%。TNF-α/ACD处理可以引起AKT磷酸化水平升高,但KYSE150GFP-E7细胞中AKT磷酸化水平的升高仍低于对照细胞。E7蛋白表达使得Survivin启动子区活性下调42.8%,而外源性过表达c-AKT及持续活化型AKT(myr-AKT)则使Survivin启动子区活性回复。外源性过表达AKT可以拮抗HPV16E7对于TNF-α诱导的细胞凋亡的促进作用。结论:初步研究结果提示,HPV16E7蛋白表达可促进TNF-α诱导的食管癌细胞凋亡,其分子机制可能是抑制AKT-Survivin通路。