【摘 要】
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发展了一种在不构建载体的前提下,以PCR产物直接构建同源重组杆状病毒的方法。这种方法建立在λ噬菌体Red重组系统能介导36bp以上的同源片段产生同源重组的基础之上。以棉铃虫单粒包埋型核多角体病毒(HaSNPV)为例,详细地介绍了以氯霉素抗性基因(Cm~R)置换HaSNPV基因组中orf135的快速重组过程。人工合成一对长60bp左右的引物,其中40bp与 HaSNPV orf135的头部和尾部序列
【机 构】
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中国科学院武汉病毒研究所无脊椎动物学病毒联合实验室,中国科学院武汉病毒研究所无脊椎动物学病毒联合实验室,中国科学院武汉病毒研究所无脊椎动物学病毒联合实验室,中国科学院武汉病毒研究所无脊椎动物学病毒联合
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发展了一种在不构建载体的前提下,以PCR产物直接构建同源重组杆状病毒的方法。这种方法建立在λ噬菌体Red重组系统能介导36bp以上的同源片段产生同源重组的基础之上。以棉铃虫单粒包埋型核多角体病毒(HaSNPV)为例,详细地介绍了以氯霉素抗性基因(Cm~R)置换HaSNPV基因组中orf135的快速重组过程。人工合成一对长60bp左右的引物,其中40bp与 HaSNPV orf135的头部和尾部序列同源,另20bp分别为氯霉素抗性基因的尾部和头部序列。以含有Cm~R的质粒PKD3为模板,利用这对引物P
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