β-NGF对人翼状胬肉成纤维细胞增生的影响

来源 :中华实验眼科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:suilong12341106
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目的 观察神经生长因子β(β-NGF)对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞(HPF) 增生的影响,探讨翼状胬肉的发病机制.方法 对翼状胬肉组织标本行组织块培养.待细胞生长汇合至80% 后以0.25%胰蛋白酶+ 0.02%EDTA 1:1 混合消化细胞,取3~5代细胞用于实验.通过细胞中波形蛋白、角蛋白及α平滑肌肌动蛋白的表达鉴定培养的细胞,免疫荧光法检测HPF中β-NGF受体trkA、p75的表达,MTT法检测不同质量浓度β-NGF对HPF的作用,Western blot及RT-PCR法半定量检测细胞核抗原(PCNA)来评估HPF的增生.结果 波形蛋白、α平滑肌肌动蛋白、trkA和p75在HPF中呈阳性表达;MTT结果显示,在β-NGF 作用12、24、48、72和96h 后,48h为β-NGF促增生的高峰期;在不同质量浓度β-NGF(5~50ng/mL)作用下,HPF中PCNA蛋白及mRNA的表达与0和1ng/mL β-NGF作用组之间比较差异均有统计学意义(Fprotein=24.980,P=0.000;FmRNA=64.490,P=0.000).结论 NGF可能通过结合两受体trkA、p75促进了HPF的增生。

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