【摘 要】
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背景：人牙周膜干细胞具有较强的成骨分化能力，人牙周膜干细胞来源外泌体作为牙周膜干细胞分泌的主要成分，对成骨细胞MC3T3-E1增殖和成骨分化的影响尚不明确。目的：探讨人牙周膜干细胞来源外泌体对MC3T3-E1细胞增殖和分化的影响。方法：采用酶消化法分离及培养人牙周膜干细胞，超速离心法提取人牙周膜干细胞来源外泌体，通过透射电镜、粒径分析及Western blot方法对人牙周膜干细胞来源外泌体进行鉴定
【机 构】
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佛山科学技术学院附属口腔医院·佛山市口腔医院牙周病科
【基金项目】
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广东省基础与应用研究基金粤佛联合基金（2019A1515110013），项目负责人：李娜；
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背景：人牙周膜干细胞具有较强的成骨分化能力，人牙周膜干细胞来源外泌体作为牙周膜干细胞分泌的主要成分，对成骨细胞MC3T3-E1增殖和成骨分化的影响尚不明确。目的：探讨人牙周膜干细胞来源外泌体对MC3T3-E1细胞增殖和分化的影响。方法：采用酶消化法分离及培养人牙周膜干细胞，超速离心法提取人牙周膜干细胞来源外泌体，通过透射电镜、粒径分析及Western blot方法对人牙周膜干细胞来源外泌体进行鉴定；CCK8法检测不同质量浓度人牙周膜干细胞来源外泌体对MC3T3-E1细胞增殖的影响，茜素红染色观察100 mg/L人牙周膜干细胞来源外泌体对MC3T3-E1细胞成骨矿化的影响，Western blot检测100 mg/L人牙周膜干细胞来源外泌体干预前后MC3T3-E1细胞内MEK和ERK的磷酸化水平。结果与结论：（1）透射电镜观察可见外泌体为脂质双分子层形成的囊泡结构，粒径检测显示外泌体直径分布在50-120 nm，集中在79.86 nm,Western blot检测结果显示提取的外泌体中含有CD81,CD63,TSG101的表达；（2）与对照组相比，人牙周膜干细胞来源外泌体对MC3T3-E1细胞的增殖具有促进作用，且作用呈剂量依赖性；（3）与对照组相比，人牙周膜干细胞来源外泌体组MC3T3-E1细胞能够形成更多的钙结节；与对照组相比，人牙周膜干细胞来源外泌体组MC3T3-E1细胞内p-MEK及p-ERK蛋白表达量升高；（4）结果表明，人牙周膜干细胞来源外泌体可以显著促进MC3T3-E1增殖和成骨分化，推测可能与其激活MEK/ERK信号通路有关。
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