丙型肝炎NS5ATP6基因原核表达载体的构建和表达纯化及多克隆抗体的制备

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目的构建丙型肝炎病毒NS5A蛋白反式激活蛋白6基因的原核表达载体并进行表达、鉴定。方法从已构建的pGBKT7-NS5ATP6质粒上切取NS5ATP6基因,再克隆入pET32a(+)质粒,构建pET32a(+)-NS5ATP6表达重组体。结果以pET32a(+)-NS5ATP6重组体分别转化DH5a和Rosseta大肠埃希菌后,经IPTG诱导,pET32a(+)-NS5ATP6表达出分子量为41KD左右的重组蛋白。免疫动物并经Westernblot检测证实其具有良好的抗原性。结论成功地构建了原核表达载体pE
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