背景:大鼠心肌细胞原代培养技术日渐成熟,但小鼠心肌细胞在同样实验条件下不易获得,而小鼠基因组与人类基因组有更多相似之处,具有更高的研究价值。目的:改进小鼠乳鼠原代心肌细胞的培养方法,得到纯度高、活力强、保持心肌细胞原有结构和功能的心肌细胞。方法:将小鼠心肌组织利用酶消方法分离为单个的心肌细胞,实验步骤中将经典的胰酶、胶原蛋白酶混合酶消法分解开,先用胰酶消化心肌组织,使心肌组织变得松散,再用胶原蛋白酶,作用于细胞间质的胶原纤维,使心肌组织分离为单个的心肌细胞。调整胰酶和Ⅱ型胶原蛋白酶的浓度和作用时间,严格控制试剂p H值和各步骤的温度。结果与结论:心肌细胞在接种24 h后开始贴壁,48 h后可观察到部分心肌细胞出现自主搏动,72 h后彼此形成交联,96 h后可观察到心肌细胞形成细胞簇,并出现一致性搏动。心肌细胞的存活率和纯度均达95%以上。结果证实,实验采用改良方法成功培养出小鼠乳鼠心肌细胞,并且保留心肌细胞的结构和功能,纯度和成活率高,是可行的培养方法。