【摘 要】
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目的 探讨重组人自细胞弹性蛋白酶抑制因子Elafin对脂多糖(LPS)致气道黏液高分泌的影响.方法 通过构建人Elafin重组质粒pEGFP-C1-Elafin,并转染人人气道黏液上皮细胞系NCI-H2
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目的 探讨重组人自细胞弹性蛋白酶抑制因子Elafin对脂多糖(LPS)致气道黏液高分泌的影响.方法 通过构建人Elafin重组质粒pEGFP-C1-Elafin,并转染人人气道黏液上皮细胞系NCI-H292,将其与多形核粒细胞(PMN)共孵育,并用LPS刺激24 h,采用底物检测法、酶联免疫吸附测定(ELISA)和RT-PCR分别检测培养细胞上清中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)活性、黏蛋白(MUC)5AC蛋白含量和细胞中MUC5AC mRNA水平.结果 LPS各浓度均可明显提高转染空载体组培养细胞上清液的NE活性、MUC5AC含最及细胞中MUC5AC mRNA水平,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01);并且在0.5~25 mg/L终浓度范围内呈剂量依赖关系.转染Elafin组与转染空载体组在不同浓度LPS(终浓度分别为0.5 mg/L和5.0 mg/L)干预时各个指标相比较差异有统计学意义(P<0.05),但在LPS终浓度为25 mg/L组各指标与转染空载体组相比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 转染重组人Elafin可抑制一定浓度范围LPS引起的炎症终效应因子NE活性及其诱导的黏液高分泌,但不能抑制高浓度LPS的作用.
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