群体感应调控的GFP报告质粒构建与表达

来源 :化学与生物工程 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hanzedong
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根据重叠区延伸基因拼接法(SOEing)设计特别的引物,运用PCR分别从pLuxI-aiiA质粒和pEGFP-N1质粒上扩增海洋费氏弧菌(Vibrio fischeri)荧光素酶操纵子的启动子pLuxI和绿色荧光蛋白基因EGFP。然后利用SOEing法将这两个独立片段拼接得到pLuxI-EGFP融合基因,接着使用AatⅡ、HindⅢ限制性酶双酶切pLuxI-EGFP融合基因和载体pluxCcdB3,再用T4 DNA连接酶进行连接,接着转化DH5α感受态细菌。挑取长出的单克隆培养并抽提质粒,经测序鉴定质粒构
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