【摘 要】
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为明确虫害诱导水稻脂氧合酶OsRCI-1的生化特性,通过构建水稻脂氧合酶OsRCI-1重组蛋白原核表达体系,对重组蛋白催化条件进行优化,并研究小分子化合物对OsRCI-1活性的影响。结
【机 构】
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浙江农林大学农业与食品科学学院; 浙江大学昆虫科学研究所;
【基金项目】
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国家公益性行业(农业)科研专项(201403030);国家自然科学基金(31572020);浙江农林大学校发展基金(2034070001)
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为明确虫害诱导水稻脂氧合酶OsRCI-1的生化特性,通过构建水稻脂氧合酶OsRCI-1重组蛋白原核表达体系,对重组蛋白催化条件进行优化,并研究小分子化合物对OsRCI-1活性的影响。结果表明,缓冲液pH和反应温度都能影响水稻OsRCI-1蛋白的催化活性,当缓冲液pH为7.0时催化活性最佳,为169.9 mol·mg-1·min-1;在检测的2050℃反应温度范围内,在25℃和45℃时出现2个催化活性高峰,分别为68.2 mol·mg-1·min-1和70.4 mol·mg-1·min-1。利用建立的OsRCI-1活性检测体系筛选出4种小分子化合物,即水杨苷异羟肟酸、水杨酸、叔丁基对二苯酚和茉莉酸,均对水稻OsRCI-1活性具有调控作用,抑制中浓度依次为0.12、418.67、232.84、2 747.19μmol/L。表明本试验所建立的靶向水稻脂氧合酶活性化合物鉴定体系可用于活性小分子化合物的快速、高通量筛选。
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